氨丁三醇缓冲液pH范围及配制方法详解

一、Tris缓冲液pH范围

Tris缓冲液在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂，它的常用有效pH范围是在“中性"范围，如：

Tris缓冲液：pH=7.5~9

Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5~8.5

Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0~9.0

二、Tris缓冲液的配制方法

1.某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制：将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与下表所示相应体积（单位：ml）的0.1ml/L HCl混合，加水将体积调至100ml。

2.Tris-HCl缓冲液的两种配置方法

第一种方法是分别配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液，然后按常用表中所列体积混合即可。

但是由于标准浓度的稀盐酸不易配制，所以常用另一种方法：以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl缓冲液为例：先称12.11 g Tris碱溶于950 mL～970 mL 去离子水中，边搅拌边滴加4 N HCl，用pH计测定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水补足到1 L。

三、其他Tris衍生缓冲液

除了Tris-HCl之外，Tris还有多种衍生缓冲液：

TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl，常用于清洗免疫染色的组织或Western Blotting中的蛋白印迹膜等；

TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20，做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液；

TE=Tris-HCl+EDTA，对DNA的碱基有保护性，常被用于DNA的稳定和储存；

TAE=Tris base+乙酸+EDTA，是大片段DNA短时间电泳时广泛使用的缓冲系统；

TBE=Trisbase+硼酸+EDTA，适用于长时间DNA电泳，对较小片段分离效果较好。

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